1實(shí)驗(yàn)部分
1．1儀器與試劑
氣相色譜儀GC7890B，F(xiàn)ID檢測(cè)器;色譜柱:SPTM-238030m×0．25mm×0．2μm石英毛細(xì)管柱;手動(dòng)微量進(jìn)樣器5μl;萬(wàn)分之一電子天平;氫氣發(fā)生器;空氣發(fā)生器;N2(99．999%)。脂肪酸 甲 酯 標(biāo) 準(zhǔn) 物 質(zhì):純 度99.5%±0．5%) ;石油醚+**(1+1) ;0．5mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液。所用試劑均為分析純。
1．2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
稱(chēng)取0．200g脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品于10ml容量瓶中，用5．0ml石油醚+**(1+1)振蕩溶解即可。
1．3樣品來(lái)源及樣品處理
1．3．1樣品來(lái)源
實(shí)驗(yàn)中所用菜籽油來(lái)源于宣漢縣東鄉(xiāng)鎮(zhèn)某加工坊(食品級(jí)) ，棉籽油購(gòu)于市場(chǎng)(食品級(jí))。
1．3．2樣品處理
1．3．2．1配制模擬摻偽油樣
按質(zhì)量百分比分別配制不同比例的模擬摻偽油樣，棉籽油含量分別為0、5%、10%、20%、30%和100%。將摻偽菜籽油置于試管中，并充分渦旋混合，使其混合均勻。
1．3．2．2甲酯化
取約0．200g油樣，置于10ml圓底燒瓶中，用5．0ml石油醚+**(1+1)邊振蕩邊溶解，靜止10min，再加入4．0ml0．5mol/L氫氧化鉀—乙醇溶液混勻后靜止10min以上，加入1．0ml蒸餾水振蕩，靜止10min以上，取上清液1．0μl進(jìn)行分析。
1．4測(cè)定方法
1．4．1色譜操作條件的選擇
進(jìn)樣:分流比為1∶36，進(jìn)樣量為1μl，進(jìn)樣口溫度220°C。
載氣:純度99．999%的氮?dú)猓d氣流量為30ml/min。
燃?xì)?H2為30ml/min，Air為300ml/min。
色譜柱:SPTM-238030m×0．25mm×0．2μm石英毛細(xì)管柱。
升溫程 序:140°C保 持2min，然 后 以5°C/min的 速 度 升 溫 至180°C，保持1min，以5°C/min的速度升溫至220°C，汽化加熱器220°C。
檢測(cè)器:氫火焰離子化檢測(cè)器(FID) ，溫度為220°C。
1．4．2數(shù)據(jù)處理方法
取1．0μl脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品待測(cè)液進(jìn)行色譜儀分析，以各脂肪酸甲酯的保留時(shí)間定性，采用峰面積校正歸一化法計(jì)算植物油各種脂肪酸成分的相對(duì)百分含量，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法(配制不同濃度模擬摻偽植物油，測(cè)定其脂肪酸組成與含量)或計(jì)算法求出單組分的含量，再計(jì)算其摻偽量。
2結(jié)果與討論
2．1純菜籽油、純棉籽油和混合油樣的氣相色譜測(cè)定及分析峰面積與濃度成正比
見(jiàn)圖1～3。
由圖1可知，棕櫚酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、芥酸、花生一烯酸是菜籽油中zui主要的脂肪酸成分，棕櫚酸、油酸、芥酸和花生一烯酸的總含量高達(dá)95．58%。
由圖2可知，棉籽油中的主要脂肪酸為棕櫚酸、油酸、亞油酸等。棕櫚酸、油酸、亞油酸的總量高達(dá)94．9%，其中棕櫚酸、亞油酸比純菜籽油的含量高出很多，其他組分都比純菜籽油的含量明顯低很多。
由圖3可知，樣品中亞油酸的含量較純菜籽油有較明顯的增加，芥酸的含量也有微小的下降。
2．2菜籽油中摻棉籽油后的主要脂肪酸組成及含量
根據(jù)脂肪酸甲酯在色譜圖上的出峰規(guī)律，即脂肪酸甲酯色譜峰按碳原子數(shù)目的增加的次序出現(xiàn)，如碳原子數(shù)目相同，則按不飽和度增加的次序出現(xiàn)，可推得各油樣中主要脂肪酸組成及含量。純菜籽油中摻不同含量的棉籽油后的主要脂肪酸組成及含量見(jiàn)表1。
從表1可以看出，當(dāng)棉籽油摻入到菜籽油中時(shí)，菜籽油的脂肪酸組成和含量就會(huì)發(fā)生改變，雖然一些組分改變的程度不大，但摻偽油的特征組分改變就很明顯，如棕櫚酸C16∶0，因此可以把它作為摻偽定性物。當(dāng)被測(cè)油的各組分含量不在GB1536－2004菜籽油的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍內(nèi)時(shí)，就可以認(rèn)為此油摻偽了。
由于菜籽油和棉籽油的脂肪酸組成及含量不同，摻偽油中的各脂肪酸含量呈現(xiàn)上升或者下降的趨勢(shì)。如表所示，我們選擇棕櫚酸作為菜籽油中摻棉籽油時(shí)的特征脂肪酸來(lái)進(jìn)行計(jì)算，計(jì)算公式為:X=(A－B)/(C－B)×100%
式中:X—為摻入某油脂的摻偽率，%;A—樣油中特征組分的百分含量，%;B—純油特征組分 百 分 含 量，%;C—摻入油脂特征組分百分含量，%。
實(shí)驗(yàn)表明:計(jì)算結(jié)果與模擬摻偽情況基本吻合，zui大相對(duì)誤差在5%以?xún)?nèi)，具體測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。
由于只依靠一種特征脂肪酸的變化規(guī)律來(lái)判斷菜籽油的摻偽情況，有時(shí)也很難對(duì)于摻偽油品進(jìn)行準(zhǔn)確的定性及定量，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，摻偽后油樣中其他種脂肪酸也呈現(xiàn)一定的規(guī)律變化，因此，也可計(jì)算其他幾種主要的脂肪酸含量，以便對(duì)于摻偽油樣進(jìn)行準(zhǔn)確分析。2．3菜籽油摻偽棉籽油檢測(cè)的工作曲線見(jiàn)圖4。
3結(jié)論
當(dāng)菜籽油中摻 入 棉 籽 油 時(shí)，用堿式甲酯化方法對(duì)油脂樣品進(jìn)行酯化，再用氣相色譜法測(cè)定其中各脂肪酸的含量，可根據(jù)樣品中棕櫚酸的含量的變化來(lái)定量檢測(cè)菜籽油是否摻混棉籽油。
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